Методы и тест-системы в диагностике ВИЧ-инфекции
Для диагностики ВИЧ-инфекции используют методы, направленные на:
а) выявление специфических антител к ВИЧ;
б) обнаружение вирусных антигенов;
в) определение наличия вируса методом культивирования in vitro.
Методы диагностики ВИЧ-инфекции
Определение антител к ВИЧ (серологические методы-ИФА и иммунный блот).
- Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявлять антитела к ВИЧ.
- Иммунный блот позволяет о пределять антитела к отдельным белкам ВИЧ.
- ИФА может давать ложноположительные и ложнотрицательные реакции.
- Образцы крови, положительные в ИФА, необходимо подтверждать иммунным блотом.
- Антитела к ВИЧ определяются как у больных, так и у здоровых детей, рожденных ВИЧ-инфицированными матерями.
- Материнские антитела циркулируют в организме ребенка до 18 месяцев, в редких случаях до 3-х лет.
- Положительные серологические тесты у ребенка до 18 мес. не подтверждают наличие у него ВИЧ-инфекции.
- При (половом, инъекционном) путях инфицирования положительный результат в ИФА, подтвержденный иммунным блотом, является основным методом диагностики ВИЧ-инфекции.
- Антитела к ВИЧ при ВИЧ-инфекции могут не определяться, если у пациента имеет место тяжелая агаммаглобулинемия.
Выявление антигена р24.
- Обнаружение антигена р24 обозначает присутствие ВИЧ в крови.
- Антиген р24 не связан с антителами только в начальный период заболевания и в период развития симптомов СПИДа.
- Выявляется только на ранних стадиях и при прогрессировании заболевания на заключительном этане болезни.
- Метод выявления антигена р24 характеризуется низкой чувствительностью у детей первых месяцев жизни.
- Если у ребенка при рождении выявляется антиген р24, то развитие раннего СПИДа в 4 раза более вероятно.
Определение ДНК ВИЧ полимеразной цепной реакцией (ПЦР)
- ПЦР- наиболее высоко чувствительный метод выявления генетического материала вируса, включенного в клетку.
- У детей первых недель жизни при исследовании ДНК ВИЧ методом ПЦР наблюдается большое число ложноположительных результатов в связи с контаминацией материнской кровью, поэтому исследовать целесообразно только веночную кровь.
- Первое исследование в возрасте 48 ч. позволяет выявить около 40% инфицированных младенцев.
- Если ребенок был инфицирован во внутриутробный период, тоуже через 48 часов после рождения определяются положительные результаты.
- Если ребенок был инфицирован во время родов, то в возрасте 48 часов жизни результаты будут огрицатсльными, но станут положительными через 1 неделю-1 месяц.
- Наиболее оптимально первый раз определять наличие ДНК ВИЧ ПЦРу новорожденных детей на 14-й день жизни (чувствительность 93%).
- В возрасте 1-2 мес. детям от ВИЧ-инфицированных матерей, у которых первый анализ был отрицательным, следует повторить определение ДНК ВИЧ методом ПЦР(чувствительность 96%).
- Детей, рожденных ВИЧ-инфицированными матерями, у которых получены отрицательные результаты теста при рождении и в возрасте 1-2 мес, необходимо повторно тестировать в 3-6 мес. (чувствительность 100%).
- Недостаток метода - необходимость дорогостоящего оборудования и достаточно высокая стоимость расходных материалов.
Выделение культуры ВИЧ.
- Высокочувствительный метод выявления ВИЧ.
- У детей первого месяца жизни ложноотрицательные результаты наблюдаются в 50-70% случаев.
- Применение этого метода диагностики ограничено из-за большой трудоемкости исследования (результат можно получить через 2-4 недели) и необходимости специально оборудованной лаборатории.
Определение РНК ВИЧ ПЦР
- Определение РНК ВИЧ методом ПЦР позволяет выявлять нуклеиновые кислоты вируса в плазме крови.
- Этот метод не используется для диагностики ВИЧ-инфекции.
- Число копий РНК ВИЧ в плазме крови, определяемое ПЦР, называется «вирусной нагрузкой».
- Вирусная нагрузка у детей старше 1 мес. и взрослых имеет очень важное значение для прогнозирования течения заболевания, его исхода, выбора тактики терапии.
- Этот метод значительно дороже, чем ПЦР на ДНК ВИЧ.
Источник: АХ. Рахманова, Е.Н. Виноградова, Е.Е. Воронин, А. А. Яковлев "ВИЧ-инфекция"
