Анализы на ВИЧ-2

Анализы на ВИЧ-2

ВИЧ-2 является эндемичным главным образом для Западной Африки, однако увеличивающееся распространение инфекции ВИЧ-2 требует применения методов, которые будут выявлять эту инфекцию. В США было подтверждено около 80 случаев инфекции ВИЧ-2, большая часть из которых связана с Западной Африкой. В биологическом отношении ВИЧ-2 весьма сходен с ВИЧ-1: геном ВИЧ-2 имеет примерно 60% гомологию с ВИЧ-1 в более консервативных генах gag и pol и 30- 40% гомологию в других вирусных генах и последовательностях LTR. Антигены ВИЧ-2 сходны с антигенами ВИЧ-1, но их молекулярные веса могут несколько отличаться. Например, белки gag (p) ВИЧ-2 обозначаются как p56, p26 и p16; белки pol p68 и p34; гликопротеины оболочки (gp) gp36 (или gp41), gp140 и gp105. Как и в случае тестов для скрининга на ВИЧ-1, существует целый ряд вариантов для выявления антител к ВИЧ-2, включая сферы для ИФА, ИФА на планшетах для микротитрования и быстрые/простые анализы.

Инфекции, вызываемые ВИЧ-2, могут создавать определенные трудности в диагностическом плане. Тесты для скрининга, предназначенные для выявления инфекции ВИЧ-1, не всегда выявляют инфекцию ВИЧ-2 и наоборот. Большинство перекрестных реакций связано с антителами, индуцированными core белком (p26) и/или pol антигенами (p68, p34), поскольку они обладают высокой консервативностью для двух указанных вирусов. Отсутствие реагирования с гетерологичным вирусом, однако, требует бдительности для выявления инфекций, которые могут казаться и не очевидными при использовании наборов для выявления ВИЧ-1. При использовании ИФА для ВИЧ-1 значения оптической плотности, выявляемые с ВИЧ-2-положительными образцами, будут представлять собой негативные, но высокие значения; при определении с помощью Вестерн блота результаты могут относиться к классу "неопределенных". Поэтому необходимо помнить о слегка повышенных, но "отрицательных" результатах и подозрительных "неопределенных" результатах при испытании на ВИЧ-1 и рассмотреть возможность испытания сыворотки с использованием реактивов для определения ВИЧ-2.

Для решения этого вопроса можно использовать имеющиеся "комбинированные анализы" на ВИЧ-1/2, которые содержат антигены обоих вирусов; они могут использоваться для скрининга сывороток с целью идентифицировать инфекцию каждым из этих типов вируса. Последующая дифференцировка между инфекциями ВИЧ-1 и ВИЧ-2 требует использования высоко специфичных методов ИФА (основанных, например, на использовании синтетических пептидов), Вестерн блота, радиоиммунопреципитации или полимеразной цепной реакции.

В конце 1991 г. FDA выдало лицензию на первый комбинированный скрининг-тест на ВИЧ-1/2 и рекомендовало начать скрининг банков крови на ВИЧ-2 к середине 1992 г. Для скрининга банки крови в США могут использовать или лицензированный скрининг-тест ИФА на ВИЧ-2 вместе с ИФА на ВИЧ-1 или один из лицензированных комбинированных методов определения ВИЧ-1/2. Образцы, которые дают положительный результат при анализе комбинированным методом, должны тестироваться с помощью Вестерн блота на ВИЧ-1. Если результат является отрицательным или "неопределенным" по данным Вестерн блота, для дальнейшего анализа образца используется один или несколько специфических анализов на ВИЧ-2. Комбинированные анализы считаются эквивалентными по своей чувствительности (т.е. практически идеальными) по отношению к предшественникам.

Подтверждающие тесты на ВИЧ-2 включают Вестерн блот и радиоиммунопреципитацию. Кроме того, хорошую корреляцию с использованием Вестерн блота и РИП для выявления и дифференцировки антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 дают ИФА и некоторые быстрые тесты с использованием химически синтезированных пептидов, соответствующих уникальному иммуногенному участку в соответствующих трансмембранных гликопротеидах. Далее, эти анализы являются ценными для дифференцировки проб, которые дают положительную реакцию на оба вируса (двойное реагирование).

Что касается подтверждения идентификации ВИЧ-2, большинство учреждений, разработавших критерии для оценки Вестерн блота как положительного в отношении ВИЧ-1, согласны, что необходима демонстрация реакции с антигенами вирусной оболочки. Критерии ВОЗ включают демонстрацию реакции по крайней мере с двумя антигенами оболочки ВИЧ-2, в то время как другие учреждения требуют демонстрации реагирования с p26 (gag) и с gp34 или gp105 (env). Если образец подвергается анализу с помощью Вестерн блота в отношении ВИЧ-1 и ВИЧ-2, то блот, дающий наиболее сильную реакцию на антигены оболочки, обычно и указывает, какая инфекция присутствует.

"Тест-системы на ВИЧ-специфические антитела" Н. Константайн, Медицинская школа Университета Мэрилэнд

Напишите нам