Дилеммы при диагностике ВИЧ

Дилеммы при диагностике ВИЧ

Основные трудности лабораторной диагностики ВИЧ инфекции, заключаются в следующем: (a) неопределенные результаты анализа с помощью Вестерн блота; (б) минимально положительные результаты подтверждающего анализа в случае неинфицированных лиц; (в) невоспроизводимые результаты при сравнении образцов или при испытании образцов, полученных в дальнейшем; (г) наличие технических ошибок; (д) ложно-отрицательные результаты, связанные с присутствием ВИЧ группы О; и (е) лабораторная диагностика ВИЧ инфекции у новорожденных.

Неопределенные результаты, получаемые с помощью Вестерн блота

В отношении образцов, которые дают неоднозначные результаты (например, неопределенные результаты, получаемые с помощью Вестерн блота), наиболее эффективным способом решения вопроса является анализ повторного образца, взятого 1-3 месяца спустя. В указанные сроки сыворотка практически у всех лиц, которые инфицированы, обнаружит повышение реактивности по данным серологических определений (например, увеличение значений оптической плотности при использовании ИФА, большое количество полос в Вестерн блоте и т.д.) или произойдет сероконверсия. Важно осуществлять анализ обоих образцов в одном и том же опыте, чтобы получить четкие указания на изменения реактивности (иными словами, гарантировать, что вариации между анализами не вносят вклад в небольшие различия в реактивности проб). В качестве альтернативного варианта можно воспользоваться иммуноферментным анализом, ПЦР, культивированием вируса или определением антигена.

Минимально положительные результаты Вестерн блота

Такие результаты наблюдаются в отдельных случаях, что может быть связано с ранними стадиями инфекции (сероконверсия), когда концентрации антител еще не достигли максимума, или же редко по неизвестным причинам у лиц, которые, как было показано позже, не инфицированы ВИЧ. В последнем случае наблюдается реагирование с p24 и слабые реакции с gp41 или gp 120/160. При такой реакции важно отметить на формуляре результатов анализа, что "в редких случаях такой профиль обнаруживается у лиц, которые не были инфицированы, и рекомендуется взять новый образец через несколько недель."

Невоспроизводимые результаты

Невоспроизводимые результаты, т.е. ситуация, когда повторный анализ образцов или анализ новых образцов от того же лица дает различные результаты, представляет собой редкое, но реальное явление. Объяснения включают неправильное этикетирование образцов, технические ошибки в лаборатории, использование разных аналитических систем или наличие сложностей с компонентами тест-системы. Если у испытуемого имеет место сероконверсия, повторное тестирование с помощью того же метода на той же пробе может дать результаты, которые флуктуируют вокруг фонового значения. Если имеет место широкая вариация значений, обычно это является признаком технической ошибки, и это следует тщательно проанализировать с использованием мониторинга системы гарантии качества. Невоспроизводимость при анализе последующих образцов может быть связана с серопрогрессией у истинно инфицированных лиц, серореверсией у лиц, которые не являются инфицированными, или с неправильным этикетированием образцов или техническими ошибками.

Технические ошибки

Технические ошибки случаются, и, хотя полностью устранить их нельзя, можно свести к минимуму используя эффективную программу гарантии качества и документированных мер недопущения ошибок. Наиболее обычными являются ошибки в записях, с чем можно эффективно бороться путем специального механизма рассмотрения регистрационных материалов руководством. Ниже будут упомянуты некоторые важные меры в отношении гарантии качества.

Ложно-отрицательные результаты в случае ВИЧ группы О

Ложно-отрицательные результаты серологических анализов на ВИЧ были верифицированы при исследовании ряда лиц, инфицированных вирусом ВИЧ О (43). Случаи ВИЧ О, встречающиеся преимущественно в Камеруне и Габоне, была также отмечены в Европе и в США (44). Известно, что несколько "приемлемых" стандартных методов для скрининга на ВИЧ дают ложно-отрицательные результаты в отношении сывороток лиц, инфицированных вирусом группы О, причем количество таких сывороток может доходить до 20% (45). Хотя трудно рекомендовать какие-либо меры, для того чтобы не допустить такого рода неправильную диагностику, производители тест-наборов решают этот вопрос, включая в наборы антигены вирусов группы О (46). Медицинские работники должны соблюдать бдительность и задавать вопросы относительно географического происхождения тестируемых лиц или вопросы относительно их контактов с лицами из указанных районов Африки. То же самое относится к инфекциям ВИЧ-2, в тех случаях, когда используются наборы, определяющие только ВИЧ-1 (см. выше).

Диагноз у новорожденного

Лабораторная диагностика ВИЧ у новорожденного представляла трудности при появлении самых первых анализов, главным образом, из-за доминирующего присутствия материнских антител в течение сроков, составляющих до 1 года после рождения; на этот момент времени может наблюдаться серореверсия ребенка. Соответственно, может пройти еще несколько месяцев, прежде чем иммунная система инфицированного ребенка станет достаточно компетентной, чтобы образовывать антитела (сероконверсия). Определение антигенов может оказать помощь при диагностике, точно так же, как и ПЦР для определения ВИЧ РНК. Однако в настоящее время достоверный диагноз инфекции у новорожденного по-прежнему остается трудной проблемой, особенно в возрасте до 6 месяцев.

"Тест-системы на ВИЧ-специфические антитела" Н. Константайн, Медицинская школа Университета Мэрилэнд

Напишите нам